GFP激發光源性能對比

GFP激發光源（EGFP激發光源）又叫綠色熒光蛋白激發光源、GFP激發光源是用于激發熒光蛋白發出熒光，通過便攜式熒光蛋白激發光源方便快捷觀察目的基因通過載體有沒有表達成功的檢測方法。市場有多家進口GFP激發光源，為什么大家喜歡LUYOR-3415這款呢？

LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發光源觀察熒光蛋白的表達位置真心很方便，可以直接用于分選水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、擬南芥的轉基因種子。能夠觀察BFP藍色熒光蛋白、GFP、EGFP綠色熒光蛋白、YFP黃色熒光蛋白、RFP、DsRed、mcherry、Tdtomato紅色熒光蛋白。美國LUYOR公司生產的LUYOR-3415RG雙波長激發光源，可以激發GFP和dsRed的發出熒光。

轉基因光源/GFP熒光激發光源性能對比

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LUYOR-3415照射下觀察GFP在煙草上的表達（圖片由LUYOR-3415用戶提供，圖片版權歸屬上海路陽生物技術有限公司，嚴禁盜用。）

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GFP熒光的激發光波長和發射光波長

GFP熒光的激發光波長和GFP的發射光波長因GFP的種類不一樣，會有差別。

GFP綠色熒光蛋白在分子和細胞生物學中的應用越來越多。由于應用的多樣性，已經開發出形成原始野生型綠色熒光蛋白（wtGFP）的幾種變體。這些變體中的幾個具有與wtGFP不同的激發和發射光譜。

wtGFP綠色熒光蛋白zui常用的突變可分為三類：

（1）紅移變體；
（2）像變體一樣的野生型；
（3）藍色發射變體。

如圖1所示，以EGFP為代表的紅移變體具有一個集中在約488  nm處的單個激發峰，發射峰波長為509 nm。類似野生型的變體的主要激發峰位于395 nm，發射峰位于509 nm，而發出藍色的突變體通常在380  nm附近有一個激發峰，在460 nm附近有一個發射峰（圖1）。

表1.GFP fluorescent protein變體的激發和發射數據

YFP的激發光波長和發射光波長

YFP激發波長為510nm(Excitation)，更大發射波長為527 nm

黃色熒光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做綠色熒光蛋白的一種突變體，zui初來源于維多利亞多管水母（ Aequorea victoria）。相對于綠色熒光蛋白，其熒光向紅色光譜偏移，而這主要是由于蛋白203位蘇氨酸變為酪氨酸。其更大激發波長為514 nm，更大發射波長為527 nm。excitation wavelength and the emission wavelength for yfp.

Yellow  Fluorescent Proteins Excitation Emission

tdtomato fluorescent protein紅色熒光蛋白的激發光波長

tdtomato熒光蛋白是屬于一種紅色熒光蛋白，可以用520nm的綠光激發(Excitation)，發射出的熒光為紅色。

tdtomato紅色熒光蛋白的激發光譜圖

RFP紅色熒光蛋白激發波長

Red fluorescent protein簡稱RFP,RFP紅色熒光蛋白的激發光峰值為532nm(Excitation)，RFP紅色熒光蛋白的熒光峰值為588nm。

常規紅色熒光蛋白分為橙色熒光蛋白(550-570 nm),紅色熒光蛋白(570-620 nm)和遠紅外熒光蛋白(>620 nm)3 種。mCherry是作為標簽的好選擇,因為它的光穩定性更強并且其具備良好的單體特性,細胞毒性低。DsRed是一種從珊瑚中分離出來的紅色熒光蛋白,具有熒光強、穩定性好等優勢。但其本身也存在許多問題。例如,DsRed 寡聚狀態是四聚體,在進行蛋白融合時容易形成多聚影響目標蛋白，DsRed 在細胞內表達會產生毒性。

Red fluorescent protein (RFP) is a versatile biological marker for monitoring physiological processes, visualizing protein localization, and detecting transgenic expression in vivo. RFP can be excited by the 488 nm or 532 nm laser line and is optimally detected at 588 nm.

RFP紅色熒光蛋白的激發光和發射光光譜圖(Excitation Emission)

mCarmine紅色熒光蛋白的激發光和發射光光譜圖

dsred紅色熒光蛋白的激發光和發射光光譜圖

mcherry紅色熒光蛋白的吸收/發射峰分別位于587nm和610nm，

常用熒光蛋白的激發和發射波長:

EBFP2，藍色熒光蛋白，激發波長383nm，發射波長448nm；
mCelulean，青色熒光蛋白，激發波長433nm，發射波長475nm；
EGFP，綠色熒光蛋白，激發波長488nm，發射波長507nm；
EYFP，黃色熒光蛋白，激發波長513nm，發射波長527nm；
mCitrine，黃色熒光蛋白，激發波長516nm，發射波長529nm；
mCherry，紅色熒光蛋白，激發波長587nm，發射波長610nm；
mRuby2，紅色熒光蛋白，激發波長559nm，發射波長600nm；
tdTomato，橙色熒光蛋白，激發波長554nm，發射波長581nm；

 mcherry激發波長(Excitation Emission)

 mcherry Fluorescent Proteins Excitation Emission

mCherry是一種來自于蘑菇珊瑚（mushroom coral）的紅色熒光蛋白，常有于標記和示蹤某些分子和細胞組分。相對于其他熒光，mcherry的好處在于它的顏色和應用zui多的綠色熒光蛋白（GFP）能進行共同標記，并且mcherry相對于其他單體熒光蛋白來說也具有卓越的光穩定型。

吸收和發射波長：

mcherry的更大吸收/發射峰分別位于587nm和610nm，對光致漂白耐受，熒光非常穩定。

 實驗室常見熒光蛋白的激發波長和發射波長

紫外熒光蛋白UV fluorescent protein   

藍色熒光蛋白Blue fluorescent protein   

青色熒光蛋白Cyan fluorescent protein   

綠色熒光蛋白Green fluorescent protein      

黃色熒光蛋白Yellow fluorescent protein   

桔色熒光蛋白Orange fluorescent protein   

紅色熒光蛋白Red fluorescent protein   

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